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第一节 临床血液学检验
血常规检查
【 标 本 】
抗凝静脉血（有些仪器也可用末梢血）。
【 方 法 】
血液细胞自动分析仪测定法。
【 试 剂 】
血液细胞自动分析仪配套试剂。
【 操 作 】
详见自己实验室血液细胞自动分析仪使用手册。
【 附 注 】
1. 血常规包括白细胞计数及分类、红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞比积、血小板计数等项目。这些项目亦有相应的手工方法，详见有关资料。
2. 半自动及全自动血液细胞分析仪从设计上均要求用抗凝静脉血。其优点为：
（1）静脉血能正确地反映病人实际情况，重复性好；
（2）利于延长仪器的使用寿命；
（3）解决了采血盘的交叉感染问题等。
3. 血细胞计数应用EDTA·K2：为抗凝剂（EDTA·K2·2 H2O 1.5～2.2mg可抗凝1ml血）。
4. 贮血容器应选用有盖塑料管。抗凝血采集后在室温中贮存应不超过6h；如需制作血涂片应在2h内完成。
5. 测定前必须将EDTA·K2抗凝血充分混匀。
6. 血细胞分析仪测定最适温度为18～22℃，低于15℃或高于30℃，均可使细胞体积发生改变，影响各参数的结果。
7. 血细胞分析仪用于白细胞分类只能当作一种过筛手段，当白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板的任何一项有明显
升高或降低；白细胞分类出现异常结果（中间细胞群百分率≥8.0%）；红细胞、白细胞和血小板的任何一个直方图出现异常图形等情况，须用显微镜检查及分类。
嗜酸性粒细胞直接计数
【 标 本 】
末梢血或抗凝静脉血。
【 方 法 】
直接计数法。
【 试 剂 】
1. Hinkelmann液；
2. 乙醇- 伊红稀释液；
3. 伊红- 丙酮稀释液。
【 操 作 】
1．小试管中加稀释液0.38ml。
2．常法取末梢血20ul，加入管内混匀，待红细胞溶解后两侧充池。
3．静置3～5min ，用低倍镜（必要时用高倍镜）镜下计数10个大方格内嗜酸性粒细胞数。总数×20×106=嗜酸性粒细胞/L。
【 附 注 】
1. 血液稀释后应于1 h 内计数完毕。
2. 充池前要充分混匀，但又不宜用力过猛。
3. 住院病人采集标本时间力求统一，以免受日间生理变化的影响。
红细胞沉降率测定
【 标 本 】
抗凝静脉血。
【 方 法 】
魏氏法。
【 试 剂 】
109mmol/L枸橼酸钠溶液。
【 操 作 】
1. 3mm×100mm试管1支，在2ml容量处刻上记号，加抗凝剂0.4ml。
2. 静脉采血后，取下针头，加血至刻度，旋转混合。
3. 用血沉管（300mm×2.5mm）吸取上述混匀血液至" 0 " 刻度处，拭去管外附着的血液，将管垂直立在血沉架上。
4. 记时，室温中静置1h，观察血浆高度，以红细胞下沉的毫米数报告之。
【 附 注 】
1. 红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋白的量与质，血浆中脂类的量和质，红细胞的大小与数量，是否成串钱相聚以及血沉管的内径、清洁度、放置位置是否垂直，室温高低等因素都有关系。
2. 标本采集时应空腹。
3. 血液和抗凝剂的比例要准确。
4. 血沉管内径要标准（2.5mm），放置要垂直。
5. 做血沉的标本要在采集后3h 内测定，并充分混匀。
6. 室温过低、过高和贫血时，对结果有影响。为此，血沉应尽量放在18～25℃室温下测定。室温过高时血沉加快，可以按温度系数校正。室温过低时血沉减慢，无法校正。
网织红细胞计数
【 标 本 】
末梢血或抗凝静脉血。
【 方 法 】
百分计数法。
【 试 剂 】
10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液或10g/L煌焦油蓝ACD溶液。
【 操 作 】
1. 于小试管中滴加1滴煌焦油蓝生理盐水溶液或煌焦油蓝ACD溶液。
2. 加入末梢血或静脉血2 滴于上述试管中，混匀。
3. 静置15～20min 后，取用1 滴制成薄片。
4. 油镜下检查1000个红细胞中网织红细胞数，以百分率或绝对值报告。
【 附 注 】
1. 活体染色时间不能过短，室温低时，放37℃温箱。
2. 网织红细胞也可用Miller窥盘计数法、荧光染色或流式细胞仪计数。
嗜碱性点彩红细胞计数
【 标 本 】
末梢血。
【 方 法 】
百分计数法。
【 试 剂 】
1. 甲醇；
2. 碱性亚甲基蓝染液（保存2～3周）。
【 操 作 】
1. 按常法制成薄血片，自然干燥后，用甲醇固定3min。
2. 用碱性亚甲基蓝染液染色1～2min，水洗待干。
3. 用油镜计数1000个红细胞中嗜碱性点彩红细胞数，以百分率报告。
【 附 注 】
1. 用碱性亚甲基蓝染液染色后，红细胞呈浅蓝绿色，嗜碱性点彩呈深蓝色。
2. 也可用瑞氏染色，嗜碱性点彩呈蓝黑色。
3. 由于点彩红细胞分布不匀，必要时扩大计数红细胞数。
红斑狼疮细胞检查
【 标 本 】
静脉血。
【 方 法 】
改良血块法。
【 操 作 】
1. 抽取患者血液2～3ml ，注于干燥试管内，于室温待凝。
2. 于凝固刚形成时，用竹签将凝块搅碎，并将残余凝块除去。
3. 以2000r/分钟离心沉淀10分钟 ，使白细胞聚集在同一层面，以利于狼疮细胞形成。
4. 置37℃温箱内温育2h。
5. 取出白细胞层及其上下各少许，置红细胞比积管中，以2000r/分钟离心，沉淀10分钟。
6. 吸去上层液，轻轻吸取白细胞层，制成薄片3～4张。
7. 以瑞氏染液染色、镜检。
【 附 注 】
1. 整个操作时间不能超过3h。
2. 注意与果馅细胞鉴别。
一氧化碳血红蛋白定性试验
【 标 本 】
末梢血。
【 试 剂 】
50g/L NaOH。
【 操 作 】
1. 取试管2支，各加蒸馏水3～5ml，一管加患者血液三滴，另一管加正常人对照血3滴，混匀。此时，如患者血中有一氧化碳，则血液呈樱桃红色。
2. 每管各加50g/L NaOH1滴，轻轻混合，正常对照管呈绿褐色，如患者血液中有一氧化碳血红蛋白，则溶血液仍呈樱桃红色，为阳性；如与正常对照色泽一致为阴性。
【 附 注 】
1. 观察结果须及时，否则樱桃红色逐渐退去，不易分辨。
2. 本试验敏感性较差，血液中一氧化碳含量到一定程度时才显阳性。如患者事先已采取通气措施，血中一氧化碳含量下降，试验可阴性。但临床症状、体征仍可能存在。
